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摘要血液样本是药物I期临床试验和生物等效性试验的基础，其质量关系着试验结果的准确性和可靠性。加强I期临床试验研究室血液样本在接收、处理、保存到转运过程的规范化管理，对保证样本质量起着至关重要的作用，也是保证检测数据真实可靠的重要前提。 医院I期临床试验研究室是为开展药物I期临床试验和生物等效性（BE）试验等研究而建立的独立医疗病区[1]。BE试验和创新药Ⅰ期临床试验数量的急剧增加给规范有效地管理大量生物样本带来了新问题和新挑战。国家药品监督管理局（NMPA）颁布的相关法规文件[1-3]虽然对临床试验中生物样本的管理做出了较明确规定，但在现场核查中，生物样本管理链仍是发生问题较多的环节之一[4]。根据NMPA药品审核查验中心年7月发布的《药物临床试验数据核查阶段性报告》数据显示，生物样本在采集、保存、运送与交接方面出现的问题占比超过5%以上。血液样本（全血、血浆、血清等）作为早期药物临床试验的重要数据载体，是I期临床试验研究室最常见的生物样本之一，其质量的好坏将直接影响检测结果的准确性，任何一个环节的疏漏或操作不当都可能造成样本质量的降低甚至无效。溶血、交叉污染、分装错误、反复冻融、超温等因素对血液样本质量影响较大，准确把握好每一个操作要点，优化和完善每一个操作流程，做到样本的精细化管理非常必要。现结合本院I期临床试验研究室近年来开展的多个BE和Ι期临床试验，重点探讨血液样本的管理流程，旨在提高试验结果的准确性。样本处理前实施要点 1充足的人员培训 临床试验开始阶段，做好相关研究人员的培训是临床试验质量的根本保证。为确保样本处理人员更深入了解样本处理的细节和要点，除了参加项目启动会外，针对不同项目进行额外专岗培训尤为重要，尤其对涉及非常规操作且样本处理条件比较苛刻的项目，如血样分装过程中需要添加特殊的稳定剂、全程冰水浴操作和避光操作等。在试验开始前针对项目具体要求在样本交接、离心、分装和储存等环节采取应对措施，同时开展模拟实操演练，做好充分的应急预案，有助于提早发现问题并解决问题，可有效避免正式试验过程中发生类似的方案偏离或违背。2明确合理的人员分工鉴于BE和I期临床试验周期长短不同，研究室的项目多以交叉方式进行，项目开展过程中为避免因人员交叉而导致部分样本无法及时处理，在试验正式实施前制定详细的样本处理时间计划表尤为重要。根据不同项目特有的采血窗口期提前规划并制定好每一位受试者的采血时间表，做到错峰交叉采血，可有效规避多个项目或多名受试者需要同时采血的情况发生；而针对不同项目的样本处理分别安排相对固定的人员负责，可降低因不同人员交替处理不同样本而发生操作失误的概率。在面对比较复杂的采血项目时，可根据样本处理时限和检测项的不同，提前绘制出清晰、明确的样本处理流程图和分工表张贴于样本室醒目之处并分发给相应操作人员，将看似复杂的样本处理过程简单化，亦可确保相关人员轻松掌握和熟知样本处理关键时间节点和各自的工作内容。3耗材的定期清点及仪器设备的日常维护某些试验项目由于开展周期较长，相关耗材（如冻存管、冻存盒、移液枪或一次性移液管、样本标签等）在使用过程中可能会出现库存不足或超过有效期的情况，定期对耗材进行盘点十分必要。样本室相关仪器设备（离心机、生物安全柜、－20℃低温冰箱、－80℃超低温冰箱、温控系统、探头等）由于使用频率较高，为确保仪器设备正常、准确，需要进行定期的检定、校准、维护和保养，而日常的维护和充分的准备工作,亦可提高仪器设备处于最佳状态的几率[5,6]。4设计完整、清晰的记录表格临床试验记录表格是临床试验的原始记录，也是临床试验数据现场核查的重点。临床试验记录表格是将临床试验重要过程以表格记录的形式呈现并保留下来，因此临床试验记录表格的设计应包括相应试验过程的关键环节[7]。过程性表格的设计既不能过于繁琐和重复化，也不可过于简单化而漏掉关键环节和操作步骤，通常针对不同项目具体需求和病房的实际标准操作规程对记录表格内容进行适当调整和完善，在确保相关记录具有高度准确性和关联性的同时，应尽可能采用统一的模板清晰记录各项数据及过程。5样本容器的摆放及核对样本容器（冻存管）是储存血液样本的重要容器，样本处理前做好容器的摆放和核对尤为重要。由于样本容器的标识通常具有足够的信息量，应易于识别和具有唯一性[1]，这决定了样本容器的摆放需要严格按照样本的采集周期、采样点和受试者编号等有规律的进行摆放。为避免冻存管发生遗漏或错放，在样本容器摆放完成后，需要至少2名相关人员逐一对样本容器进行交叉核对。考虑到后期分装过程中可能发生各种突发状况和意外而导致分装错误或使容器受到污染，备好充足的备用耗材（冻存管、冻存盒、空白标签等）以便后续随时进行替换是样本处理前的重要实施要点。样本处理过程中的实施要点 1样本接收样本接收环节的重点在于准确核对每一个血液样本的内容物，除了要认真核对样本的标识、状态、数量以及转运条件外[8]，还需要采取正确的操作方式接收样本。在接收到样本的第一时间应将样本管口向上、垂直放置，减少对管状物的震动，促进样本凝血完全，可有效降低溶血的可能性[9]。对于很多早期药物临床试验，由于每个受试者在不同访视周期、不同时间点所需采集的血样有所不同，需要收集样本的类型（血清、血浆、全血、血细胞等）和检测项目，如药动学、药物对机体产生的治疗作用和不良反应、腺苷脱氨酶、细胞因子、生物因子等也有所不同，接收样本时根据样本进离心机的时限要求和静置条件（室温、冷藏、冰水浴等）的不同做好分类摆放和记录非常重要，特别是对于需要收集血清的样本，在方案规定静置的时限要求（一般是30~60min）内，不可随意用一次性吸管或移液器枪头等剥离凝血块，须待血标本自发完全凝集后方可进行离心操作，若凝结时间不足，潜在的纤维蛋白会与酶标记的物质出现非特异性结合，导致结果出现假阳性，从而引起检测结果出现错误或偏差。2样本离心样本的离心处理是整个血液样本管理中重要的操作环节之一，对试验结果的准确性起着关键作用[10]，离心机各项参数（离心转速或离心力、离心温度、离心时间等）的设置是整个离心环节的核心要素，不当的离心条件会严重影响样本的质量：离心速度过高或离心时间过长容易造成血样发生溶血；而离心速度过低或离心时间过短，将会导致样本分离不充分，部分物质保留在血浆或血清中会严重干扰后期的检测分析。因此，在血液样本离心前，样本处理人员需反复确认离心机的各项参数是否设置正确。对于某些质量易受温度影响的血液样本，离心操作时除了控制好离心的温度，还需要提前对离心机进行适当的预冷或预热，以保证样本进入离心机后能达到所需要的适宜温度。不同的试验项目因检测项目不同，采血管所使用的抗凝剂也不同[11]，如某些用于生化、免疫等检验需要获得高品质的血清样本，通常会在采血管中添加医用高分子分离胶，在离心过程中若出现试管中凝胶附着在底部，与血样没有充分混匀，可在方案允许的离心速度范围内采用更高的转速重新离心，以达到重新混匀并分离的效果。3样本分装血液在离开人体后，血液环境的稳定性与保存时间的长短呈反比，应尽快开展血清、血浆的分离。实际操作过程中，对于不能马上进行血清或血浆分离的血液样品，应尽量冷藏保存和运输，避免冷冻，以免血细胞形成冰晶造成细胞破裂而出现溶血。分离血样时候，除了尽可能避免分装错误和保证样本的基5本装量外，还应该重点 |
